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什么是线粒体?
线粒体两种状态:细胞内和游离
1.细胞内线粒体
细胞内mtDNA 拷贝数变异引起线粒体功能紊乱, 与衰老及多种疾病如糖尿病、心血管疾病、神经系统疾病和肿瘤等密切相关。
2. 游离线粒体
l 外周血游离线粒体DNA (ccfmtDNA)与癌症之间显著相关,可作为一种非侵袭性的潜在适用性较大的肿瘤标志物。
l 血浆游离 mtDNA 拷贝数与烧伤病情相关指标(烧伤面积、烧伤指数)呈正相关
l ccf-mtDNA水平与抑郁和失眠等合并症呈正相关
检测原理
细胞mtDNA检测原理:双色荧光TaqMan探针法定量PCR技术,FAM荧光根据标准曲线计算线粒体拷贝数,VIC荧光根据标准曲线计算细胞数目。(标准曲线A+B )
标准曲线A(线粒体通道FAM)
标准曲线B(内参通道VIC)
游离mtDNA检测原理:双色荧光TaqMan探针法定量PCR技术,FAM荧光根据标准曲线计
算线粒体拷贝数,VIC荧光质控游离基因组DNA抽提是否合格(标准曲线A)
特色与优势
l TaqMan探针法,准确度优于SYBRGreen法。
l 双重荧光,提高检测效率,减小孔间差,结果更稳定。
l 多重反应,减少试剂用量,性价比更高。
l 一个试剂盒检测两种状态线粒体CNV。
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